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黃曲霉毒素是由黃曲霉、寄生曲霉和集峰曲霉產(chǎn)生的次生代謝物,目前已知的黃曲霉毒素是AFBl、AFB2、AFB2、AFM1、AFM2、AFP1、AFQ1和AFH1等18種屬于該類的毒素。屬于有害物質(zhì),廣泛存在食品中,因此需要對其進行檢測,控制含量在允許范圍內(nèi)至關(guān)重要。
那么,黃曲霉毒素檢測方法有哪些呢?
1、薄層分析法
薄層分析法是檢測黃曲霉毒素較為經(jīng)典的方法,也是以前較為常用的方法,至今仍為一些檢測機構(gòu)所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃曲霉毒素從試樣中萃取出來,經(jīng)柱層析凈化后,再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉毒素的熒光特性,根據(jù)熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,對于一些組分很復雜的試樣要雙向展開,才能獲得較高的靈敏度。
2、液相色譜法
液相色譜法是近年來發(fā)展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統(tǒng)分離,再用熒光檢測器測定。與其配套的柱后衍生系統(tǒng)有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離,其凈化效果優(yōu)異。
該法能準確地分離不同種類的黃曲霉毒素,檢測速度快且定性與定量準確,檢測限低,可作為仲裁法使用,但儀器設備價格昂貴,前處理方法相對繁瑣,若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加,對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。
3、酶聯(lián)免疫法
酶聯(lián)免疫法也是近年來研究開發(fā)出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據(jù)抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,較后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。
該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
4、毛細管電泳法
毛細管電泳法也是一種新發(fā)展起來的分析黃曲霉毒素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器連用可很好地提高靈敏度。Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定較為靈敏。但毛細管電泳法的成本較高,操作復雜,不適宜在試樣檢測中廣泛應用。
5、熒光光度法
熒光光度法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃曲霉毒素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃曲霉毒素的含量。
該方法對檢測人員身體健康無危害,檢測速度迅速,靈敏度高,適用于大量試樣檢測,且定量準確,但檢測費用較高,需要配置專用設備,且不能對單一的毒素進行檢測。
6、生物傳感器法
生物傳感器是使用固定化技術(shù)將具有分子識別能力的生物活性物質(zhì)與物理化學換能器結(jié)合,可以用來探測生物體內(nèi)外的環(huán)境化學物質(zhì)或與之起特異性交互作用后產(chǎn)生響應的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物傳感器為免疫傳感器口。根據(jù)能量轉(zhuǎn)換器所傳導的物理或化學信號的不同,免疫傳感器又可分為電化學免疫傳感器、光學免疫傳感器、壓電晶體免疫傳感器等。由于生物傳感器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合于現(xiàn)場檢測等優(yōu)點,因此各國科研工作者正積極探索研制新型生物傳感器用于檢測黃曲霉毒素。
7、儀器檢測方法
儀器檢測法一般是采用糧食真菌毒素檢測儀,該儀器更加適合現(xiàn)代糧食安全普查,檢測樣品涵蓋糧食、食用油、調(diào)味品、飼料等;樣品處理簡單,檢測速度快,檢測項目包括檢測項目:黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、伏馬毒素、T2毒素、黃曲霉毒素M1 。糧食真菌毒素快速檢測儀適用于各類畜牧養(yǎng)殖企業(yè)、谷物生產(chǎn)企業(yè)、面粉廠、方便面廠、第三方檢測機構(gòu)及各政府監(jiān)管部門。